上海高效液相色譜儀的原理是利用不同待分離物質(zhì)在兩相中的親和力差異,如分配系數(shù)、吸附容量等。利用外力,含有樣品的流動(dòng)相通過(guò)固定在柱或平板上的固定相表面,該固定相與流動(dòng)不相溶。當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí),混合物中的組分與固定相相互作用。
液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,HPLC所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問(wèn)題有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無(wú)機(jī)分析等各種領(lǐng)域。液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜-質(zhì)譜連用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發(fā)展很快如在環(huán)境污染分析測(cè)定水中的烴類,海水中的不揮發(fā)烴類,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。
為了保證上海高效液相色譜儀使用的穩(wěn)定性,我們對(duì)于設(shè)備使用環(huán)境是有一定要求的,包括:供電、環(huán)境溫度、照明、通風(fēng)和濕度以及潔凈度,其中:
1、供電:液相色譜室應(yīng)設(shè)有照明電源和動(dòng)力電源,動(dòng)力電可供儀器運(yùn)行使用。為減少噪音的干擾,而儀器應(yīng)遠(yuǎn)離瞬時(shí)供電的大功率電器設(shè)備,如大型電動(dòng)設(shè)備、電梯、空調(diào)系統(tǒng)等。為保證HPLC輸液泵的精度,必須要保證穩(wěn)定的輸人電壓,為此,建議色譜室應(yīng)設(shè)有和儀器負(fù)荷相當(dāng)?shù)姆€(wěn)壓電源。
2、環(huán)境溫度和濕度:適宜的溫度和濕度是保障HPLC儀正常運(yùn)行、性能穩(wěn)定的必要條件。一般要求室溫在20一30℃之間,日溫度變化2一3℃,不要波動(dòng)太大,否則,在開(kāi)機(jī)分析時(shí)會(huì)影響色譜分離,夏季一定要控制室溫不要超過(guò)30℃,溫度太高會(huì)使流路系統(tǒng)產(chǎn)生氣泡,影響檢測(cè)器的正常工作。室內(nèi)相對(duì)濕度應(yīng)控制在60%以下。
3、照明:室內(nèi)照明要光線適中,避免陽(yáng)光直射。為避開(kāi)直射光線對(duì)儀器操作、觀測(cè)的影響,儀器應(yīng)側(cè)向光線。實(shí)驗(yàn)室窗戶要掛窗簾,以便隨時(shí)調(diào)節(jié)光照強(qiáng)度。
4、通風(fēng):使用液相色譜儀分析過(guò)程中,由于流動(dòng)相中含有揮發(fā)性有機(jī)溶劑會(huì)產(chǎn)生有害氣體,對(duì)儀器中的光學(xué)元件帶來(lái)腐蝕,應(yīng)注意儀器室的通風(fēng),以排除室內(nèi)有害氣體、保持空氣清新。通風(fēng)主要有兩種方式:一種自然通風(fēng),定時(shí)打開(kāi)門窗,讓內(nèi)外空氣對(duì)流;另一種是強(qiáng)制通風(fēng),如用通風(fēng)柜、排風(fēng)扇等,及時(shí)將有害氣體排出室外。
5、潔凈度:懸浮于空氣中的顆粒物質(zhì)會(huì)對(duì)色譜儀器分析帶來(lái)干擾,使本底和噪聲升高,成為分析測(cè)試的污染源,直接影響高純物質(zhì)的純度與痕量雜質(zhì)的分析。